在酸和铝联合作用下,锦鲤鱼脑的SOD活性会发生什么变化?

2023-10-24 06:10:21 字數 5074 閱讀 8107

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文 | 林轻吟。

编辑 | 林轻吟。

摘要。该实验目的是研究酸(dh=5,al=og/l)铝(dh=7,a1-800g/单独及联合dh5,a1=800g/)作用下,锦鲤鱼脑、肾、肝、超氧化物歧化酶(sod)活性的反应变化情况。

结果表明,与对照组(ph=7,al=0μg/l)比锦鲤鱼脑无论在酸、铝单独作用还是联合作用下sod活件在染毒第1天均隆低(0.01)。

但随后铝联合、单作用组分别在3d、9d恢复正常肾sod则只有在铝联合作用下,且只有在染毒第1天立生显著抑制(p<0.01),随后恢复正常sod则无论在何种情况下,均无抑制现象发生。

铝是自然界中最丰富的金属元素,常以难溶性的硅酸盐或氧化铝的形式存在于一系列含铝矿物中,约占地壳总量的7%~8%。

然而日益加剧的酸沉降污染造成大范围土壤和沉积物中铝的溶出释放,同时铝工业、有色治金、油漆、橡胶等行业排放的含铝废水经由各种途径汇入江河、湖泊及水库中。

加上当前水处理行业中普遍采用铝盐净水剂进行絮凝沉淀处理,也造成了出水中残余铝含量的增加。

水环境中的酸铝对生活在其中的鱼类健康构成了直接潜在的威胁,迄今为止,国内外学者在酸性条件下,铝对鱼类的毒性效应已经作了大量的研究。

一般认为,淡水鱼类生存的ph值范围是4~10,安全范围是5~9,即当水体ph值降低到不足以杀死鱼类时,铝的毒性就会使鱼大批死亡。

在酸性条件下,带正电的铝离子会与鳃表面带负电荷的部位相结合形成铝聚合物而沉积在鳃表面。

引起鳃部粘液细胞积累,鳃片阻塞,削弱鳃的离子交换能力和呼吸功能,导致鱼体渗透压调节失控、急性缺氧、鳃上皮坏死等。

铝会致骨髓细胞和精子形态畸变,会导致体内氧化应激损伤,导致血清、脑组织的超氧化物歧化酶活性降低,脂质过氧化物升高等等。

超氧化物歧化酶(sod),是生物机体内重要的抗氧化酶,它是超氧阴离子自由基(o2-·)最有效的清除剂,保护细胞免受活性氧自由基氧化损伤。

一般来说,有毒污染物可导致生物体内o2-·增加,sod为了消除增多的o2-·防止细胞膜系统过氧化作用的发生而被诱导(增加)、消耗抑制。

sod诱导效应可认为是生物体克服不良环境和防止中毒的一种适应性改变,而活性减弱则反映了生物体对环境压力较为敏感,可能受会受到氧化应激损伤。

因此sod的活性可反映机体清除自由基的能力,经常被用作环境胁迫与水域污染的潜在指标。

就我国目前而言,铝虽还未列入地表水环境质量控制标准中,但铝污染普遍存在。

据调查,我国部分江水和地表水中铝的含量在0.164~0.322mg/l之间,部分城市雨水中的铝含量也高达0.373mg/l3而且我国绝大部分地表水的ph在6.4~9.2之间,平均值普遍在7以上。

所以我国境内的鱼主要在中碱性条件下受着铝的毒害,但相关的研究却很少见到。

基于上述情况,本研究以易得易养的具有本地代表性的锦鲤鱼为实验对象,以鱼体脑、肾、肝中sod酶的活性的变化为指标。

不仅设置了酸作用组、酸铝联合作用组,同时也设置了中性铝作用组(简称铝作用组)。

这不仅有利于全面认识水环境中的铝对鱼的潜在危害,也可为保护水环境、渔业资源提供基础数据,同时为水质评价提供重要参考。

试验与方法。

选用红锦鲤,购自金华花鸟鱼虫市场,**可靠品种纯正。将鱼转移到实验室后先经5mg/lkmno的表面消毒。

然后在曝气2d的自来水中驯养15d当鱼连续7d没有出现死亡情况,视为鱼已经基本适应实验室环境,备用。

选用健康、体型大小相近的红锦鲤进行实验鱼平均体重为(21.3+1.3)g,平均体长为(9.06+0.51)cm。

本实验共设4个处理组:对照组(ph=7.0,al=0wg/l)、铝作用组(ph=7.0,al=800g/l)、酸作用组(ph=5.0,al=0ug/l)、酸铝联合作用组(ph=5.0,al=800ug/l)。

分别在容积为30l的鱼缸中进行,每组设2个鱼缸,每个鱼缸注入25l预先曝气24h的自来水和2尾鱼。

实验期间水温为(20+i)℃,ph为(7.0+0.1)、(5.0+0.),水的硬度为ca2=0.104mmol/l,自然光照。

实验过程未发现异常现象,每次实验结束后,从缸中捞取鱼,迅速取出脑、肝、肾存于1.5ml的离心管并保存在-20℃的冰箱,于1周内匀浆测定。

从冰箱内取出组织,解冻,在预冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重后,按重量体积比加9倍的0.86%生理盐水,通过手工匀浆制成10%的匀浆,3000r/min离心1min,取上清液,按照试剂盒说明测定sod酶、总蛋白质含量。

实验结果。从图1可看出,染毒第1天,锦鲤鱼脑无论在铝作用下、酸作用下,还是在两者共同作用下,与对照组相比较,sod酶活性均显著降低。

但到了第3天,酸铝联合作用组对sod酶的抑制减弱其活性基本达到了正常水平。

而酸、铝单独作用组对sod酶活性仍表现为显著抑制(p<0.05、p<0.01),实验第9天,sod酶活性无论是铝处理组、酸处理组、还是在联合处理组,其活性均无显著差异,这说明铝、酸对锦鲤鱼脑sod酶活性的抑制随着暴露时间的延长而减弱。

从图2可看出,染毒第1天,锦鲤肾的sod酶活性只有在酸铝联合作用下较对照组有显著下降(p<0.05)。

到第3天和第9天锦鲤鱼肾无论在铝作用下、酸作用下,还是在两者共同作用下,与对照组相比较,sod酶活性均无显著降低。

说明铝、酸单独作用下,对肾的sod酶活性无影响,而在两者联合作用下,在暴露初期便可出现抑制,但随着时间的延长,便马上恢复正常。

从图3可知,锦鲤肝的sod酶活性无论是在铝作用下、酸作用下,还是在两者共同作用下。

与对照组相比较,sod酶活性在实验第139天均无显著降低,这说明铝、酸对锦鲤肝的sod酶活性无抑制,随着时间的延长亦无变化。

讨论。在本实验中,无论是酸、铝单独作用下还是联合作用下,锦鲤sod活性或没有变化或呈抑制状态。

这反映了酸、铝可对鱼体的抗氧化系统产生不良影响本实验还发现锦鲤脑、肾、肝组织细胞的sod活性差别很大,肝比脑、肾的sod活性高2~4倍不等这可能与它们的生理功能不同有关。

肝脏是体内主要的解毒器官,肝巨噬细胞有活跃的吞噬能力9,毒物在肝脏内氧化、还原或水解过程中会产生大量的o2-。

相应的肝组织sod活性高,而脑、肾分别是神经器官和排泄器官,组织内sod担负的解毒任务相对较轻,所以本身的sod活性相对较弱。

同时这3个器官对酸、铝的敏感性也截然不同,脑组织sod对酸铝单独作用或联合作用都较为敏感。

在染毒第1天就呈显著抑制的反应,而肾则只是对酸铝联合作用较为敏感,在第1天呈显著抑制状态。

反应最不敏感的则是肝,无论在酸作用下、铝作用下,还是酸铝联合作用下,与对照相比均无显著变化。

这说明在酸、铝短时间作用下,鱼的脑、肾组织很可能会受到活性氧的攻击和伤害。

但从第3天第9天的染毒情况来看,这种伤害并不持久,随着暴露时间的延长,锦鲤逐渐适应酸铝环境,肾、脑sod活性分别到了第3天第9天,恢复到正常水平。

这说明本实验选择的锦鲤鱼对酸、铝具有强大的适应和抵抗能力,这可能也是本实验在软水环境(ca2+=0.104mmol/l)低ph条件下高达800ug/l的铝浓度下,却没有一条锦鲤鱼死亡的原因。

在低ph的软水环境里,铝离子对一般淡水鱼类的96~168h的lc值大致在76~547ug/l之间120-211。

还有值得注意的一点是,酸、铝单独作用对锦鲤鱼脑sod的活性的抑制效应较其联合作用更强。

即低ph与铝两者对sod的影响不存在协同毒性效应反而呈相互抵消的趋势,这与酸、铝对肾sod的影响刚好相反。

这说明虽然鱼脑sod对酸铝的联合作用较为敏感,但应该不是导致鱼死亡的根本因素。

结论。在前述实验条件下,我们得出以下结论,这将帮助我们更好地理解酸和铝对锦鲤鱼的影响,而无需深入科学领域:

酸和铝对锦鲤鱼的不同器官sod的抑制效应按照强度依次是:脑》肾》肝。

这意味着锦鲤鱼的脑部sod最受影响,其次是肾脏,而肝脏的sod则相对较不受干扰。

这是重要的发现,因为sod是一种抗氧化酶,它有助于保护机体免受氧化损伤。

随着暴露时间的延长,酸和铝的单独以及联合作用对锦鲤鱼的sod抑制效应逐渐减弱。

这表明,锦鲤鱼可能在一定时间内逐渐适应了这两种化学物质的影响,或者其自身的防御机制被激活。

对于锦鲤鱼的脑部sod,单独的酸或铝作用会导致更强的抑制效应,而联合作用下的抑制效应较弱,这表明酸和铝可能在脑部发挥一定的竞争或拮抗作用。

但对于肾脏sod,联合作用下的抑制效应明显大于单独的酸或铝作用。

这表明肾脏对这两种因素的联合影响更为敏感,这是一个值得深入研究的重要方向。

这些结论揭示了锦鲤鱼对环境中酸和铝的不同反应,以及这些反应如何随时间和不同器官的变化而变化,这对于我们保护水生生态系统和生物多样性具有重要的指导意义。

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