豬瘟病毒抗體檢測試劑盒

2023-10-15 02:00:05 字數 2895 閱讀 6912

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通用名稱:豬瘟病毒抗體檢測試劑盒(間接elisa)

英文名稱:classicalswinefevervirus(csfv)antibodytestkit(indirect elisa)

包裝規格】96份/盒、192份/盒。

【預期用途】本試劑盒採用間接 elisa方法定性檢測豬血清或血漿中的特異性豬瘟病毒抗體,可作為豬瘟病毒疫苗的免疫監測及該病的輔助檢測。

【檢測原理】如果待檢樣品中含有豬瘟病毒抗體,就會與包被板上的豬瘟病毒重組抗原及第二步加入的抗豬二抗酶標結合物特異性結合。間接結合在包被板上的抗豬二抗酶標結合物與底物反應的顯色狀況即可反映出樣品中是否含有保護水平的豬瘟病毒抗體。

主要組成成份

儲存條件及有效期】 2~8℃儲存,防止冷凍,有效期為 12個月。

適用儀器】 含 450nm和 630nm波長酶標儀;37℃恆溫裝置;可調微量移液器。

樣品要求

1. 本試劑僅適用於檢測豬血清或血漿。

2. 為取得最佳實驗效果,避免使用含疊氮鈉、高血脂、長菌以及嚴重溶血的樣品;

3. 短期(3天內)將進行檢測的血清樣品可存放於 2~8℃;如需長期儲存,應置於-20℃以下,避免反覆凍融。

檢驗方法

1. 洗滌液配製:用蒸餾水或去離子水將洗滌液 10×(2號液)按 1:10稀釋(例如,取。

100ml洗滌液 10×,加 900ml蒸餾水或去離子水混合),充分混勻即為工作濃度洗滌液。

2. 樣品稀釋:用樣品稀釋液(5號液)將待檢血清按 1:40稀釋(血清稀釋板使用方法詳見說明書背面),充分混勻。 陰性、陽性對照品不用稀釋,直接加樣。

3. 加樣反應:樣品孔,每孔僅加入 100μl待檢樣品;空白對照 2孔,每孔僅加入 100μl樣品稀釋液;陰性對照 2孔,每孔僅加入 100μl陰性對照品;陽性對照 2孔,每孔僅加入 100μl 陽性對照品。蓋好封板膜,37℃避光反應 30 分鐘。

5. 加酶反應:除空白對照孔外,其餘每孔加酶標結合物(1號液)50μl,蓋好封板膜,37℃避光反應 30分鐘。甩去孔內液體,如上洗板,拍乾。

6. 顯色反應:按所需用量,臨用前取等體積底物液(3號液)和顯色液(4號液)充分混勻,每孔加 100μl,蓋好封板膜,37℃避光反應 10 分鐘。

7. 終止反應: 加終止液(6號液)50μl,以空白對照調零,用酶標儀於 450nm波長(630nm

作為參比波長)讀取 od值。

參考值

1. cut-off值 (cov)=陰性對照平均 od值×2.1 (陰性對照孔od值<0.08時,按 0.08計)。

2. 有效性判定:

陰性對照孔 od值≤0.15(若大於 0.15則實驗無效);陽性對照孔od值≥0.50(若小於 0.50則實驗無效)。

檢驗結果的解釋

樣品 od 值≥cov,判為豬瘟病毒抗體陽性;樣品 od值<cov,判為豬瘟病毒抗體陰性。

檢驗方法的侷限性】本試劑盒僅供篩查,不作為確診依據。

注意事項

1. 試劑盒各組份從冷藏環境中取出時,必須平衡至室溫後,方可開封啟用。未使用完的試劑組份應及時放回 2~8℃密封儲存。

2. 加試劑前應將試劑輕搖、混勻。

3. 孵育時必須用封板膜密封板孔,封板膜不可以重複使用。

4. 不同批次試劑盒的試劑組份或說明書不可混用。瓶蓋每次使用後要蓋緊,各瓶之間瓶蓋不可混用。

5. 用棄的試劑盒及樣品都應按汙染物妥善處理。試劑盒內終止液有腐蝕性,須小心使用。

【生產企業】廣州華南生物工程***

2023年9月,日本岐阜縣一養豬場發現感染豬瘟的病豬,約有80頭豬死亡,這是日本時隔26年再次爆發豬瘟疫情,在同年11月、12月又陸續爆發兩起疫情。 [1]2023年2月6日,日本農林水產省宣布,疫情已擴散至愛知縣、長野縣、滋賀縣以及大阪府。由於岐阜縣與鄰縣愛知縣出現疫情最多,兩縣已開始嘗試給野豬投喂包含疫苗的食物,以防疫情經由野豬傳播蔓延。 [2]2023年3月28日,日本愛知縣**宣布,該縣又一家養豬場出現豬瘟疫情。至此,愛知縣出現疫情的養豬場已達20家。 [2]2023年7月29日,日本農林水產省宣布,日本福井縣乙個養豬場出現豬瘟疫情。自2023年9月以來,日本豬瘟疫情已經從岐阜一縣擴散到全國7個府縣。 [3]2023年9月13日,埼玉縣秩父市的養豬場飼養的豬感染了豬瘟。埼玉縣召開緊急對策會議,決定到14日為止對該養豬場飼養的678頭豬實施撲殺 [4] 。2023年9月14日,長野縣鹽尻市畜產試驗場的家豬確認感染豬瘟。這是繼岐阜、愛知、三重、福井、埼玉之後,在養豬場確認豬感染豬瘟的第6個縣,長野縣已開始對試驗場內飼養的約350頭豬實施撲殺處理。 [5]2023年9月,日本時隔26年再次發生豬瘟疫情,隨後疫情擴散至全國多地。到2023年9月,由於未能在兩年內撲滅豬瘟疫情,日本失去了世界動物衛生組織認定的豬瘟「淨化國」地位,這意味著日本產豬肉出口會受到影響。2023年4月17日,據栃木縣**和日本農林水產省發布的訊息,栃木縣那須鹽原市的兩個養豬場出現豬瘟疫情,兩個養豬場共飼養2.8萬頭豬,沒有發生疫情的另乙個相關養豬場約9000頭豬也將同時被撲殺。