细胞支原体污染PCR检测与支原体清除

2023-11-07 05:55:22 字數 1775 閱讀 4463

一、细胞支原体污染的表现

支原体是一种原核生物,支原体是最小和最简单的自我复制生命体。由于支原体体积小(100nm),缺乏刚性的细胞壁,因此肉眼无法检测到支原体,它们可以透过0.2μm的标准过滤膜,并对很多抗生素都具有抵抗力,可以感染多种细胞类型,包括动物和人类细胞。细胞支原体污染在细胞培养、疫苗制备和基因表达等领域中非常常见,尤其是在细胞系的研究和生产过程中,其主要表现如下:

1. 细胞形态改变:细胞支原体感染后,细胞形态会发生改变,表现为细胞大小和形状的变异。

2. 细胞生长受限:细胞支原体感染会影响细胞的生长和增殖,导致细胞培养的增殖速度减慢或无法生长,从而影响实验的进行。

3. 细胞功能异常:细胞支原体感染还会导致细胞内代谢活性下降和功能紊乱,影响细胞信号传导和基因表达等生物学过程。

二、细胞支原体污染的危害

受支原体感染的细胞支原体会与宿主细胞竞争营养素和代谢物前体,并改变许多细胞功能,从而影响细胞代谢与生长从而导致细胞死亡。通过对微阵列分析发现支原体严重影响数百个基因的表达,当中包括受体、离子通道、生长因子和致癌基因。其一旦与宿主细胞膜粘附或融合,支原体可以通过干扰信号级联和细胞因子产生,从而损害细胞。因支原体污染而导致的细胞功能异常会干扰实验数据,导致研究结果无效。

除此之外,在健康安全风险方面,支原体属于一类生物安全级别较高的病原微生物,能引起人体疾病,污染的细胞制品,会对实验人员的健康造成威胁。三、pcr检测方法介绍

pcr是一种常用的分子生物学技术,可用于快速、特异、敏感地检测细胞支原体的存在。海星生物根据《欧洲药典》要求检测的支原体种类自助研发设计,经过多重验证,使用的支原体特异性引物可对检测样品进行精准检测,实验添加阳性质控标准品及阴性对照组,准确判断样品是否存在支原体污染,为后续实验保驾护航。

支原体pcr检测数据。

支原体感染会使培养细胞慢慢枯萎,因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。一般来说每1至3个月就应该进行一次支原体检测。将定期支原体检测常规化坚持下去,是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。四、支原体清除与预防

在细胞支原体污染方面,海星生物自主研发的hycyte®支必清支原体清除/预防试剂可以有效清除/预防支原体。经验证,可有效去除/防止莱氏无胆甾原体(acholeplasma laidlawii)、精氨酸支原体(mycoplasma arginini)、猪鼻支原体(mycoplasma hyorhinis)和口腔支原体(mycoplasma orale)等动物细胞培养中85%以上支原体菌株污染的。除此之外hycyte®支必清支原体清除/预防试剂对培养细胞没有细胞毒性***不影响后续细胞实验,该试剂盒是支原体清除的不二选择。

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