有哪些方法可以檢測是否感染了HPV?

2023-07-20 15:11:13 字數 1700 閱讀 9789

hpv還不能進行體外病毒培養,組織切片或細胞塗片後染色鏡檢方法的靈敏度也比較低,而臨床常用於其他病原體檢測的血清學方法對於診斷hpv感染來說結果也並不可靠。目前臨床上直接或間接檢測hpv的手段主要包括以下幾個方面:一是組織活檢,通過細胞的形態學改變來判斷。典型的改變是表皮細胞核周空泡等。也可以進一步進行免疫組化檢測,準確性較高,但由於是有創傷的操作,取材麻煩,實際應用相對不多。二是液基細胞學檢測(tct),tct在一定程度上也可以檢測hpv感染的存在,不過與分子生物學檢測的方法比較,敏感性較差。三是依賴於分子生物學技術手段對hpv dna進行檢測,包括核酸雜交和pcr方法等,根據具體的方法,可以對hpv進行定量檢測和分型檢測。這些方法包括傳統雜交法、雜交捕獲法、pcr法等。下面簡單介紹一下分子生物學方法。

一、傳統雜交法。

特異度高、直觀等優點,但操作複雜,靈敏度較pcr法低,而且需要新鮮組織樣本,不便於臨床推廣。

二、雜交捕獲法。

由美國digene公司生產的第二代雜交捕獲法hybridcaptureⅱsystems(hc2)是一種液相雜交法,是目前為一被美國食品藥品監督管理局批准的hpv dna檢測技術,它能同時檢測出13種高危型型病毒(hpvl)和5種低危型病毒)。雖然美國cdc批准了hc2檢測低危型,但目前國內的試劑只能檢測高危型。hc2高危型檢測靈敏度較好、重複性高,但其缺點在於不能確定具體hpv亞型,且檢測成本昂貴,在經濟欠發達地區很難推廣。另外,hc2還存在一定的交叉雜交的問題,有時會引起假陽性結果。

hc2檢測是目前臨床高危型hpv檢測領域很重要,很常用的方法,也是宮頸癌篩查的手選方法。hc2統一的臨床判定標準≥/ml(相當於5000病毒拷貝/次)。需要特別指出,hc2 hpvdna檢測結果陰性並不代表完全沒有感染hpv,只是代表其體內hpv含量低於5000拷貝/次。病毒含量低於該水平,則在至少3-5年內發生宮頸上皮瘤變cin2/3級病變的可能性是非常低的。也就是說,罹患宮頸癌的風險是非常低的。若檢測結果為陽性, hc2 hpv dna≥/ml(5000copies/ml),則應當每年定期進行hc2複查,若連續兩年檢測結果陽性,應諮詢醫生進行下一步檢查或**,年齡大於30歲女性更應密切監測。宮頸癌手術後的病人監測hc2可**病變惡化或手術後**的風險。

三、pcr法。

以pcr為基礎的檢測方法是目前認為較好的hpv dna檢測及分型方法,主要分為基因擴增和產物分析兩部分。它能用於hpv定性及半定量檢測、dna測序和基因突變分析。

1、pcr基因擴增。

包括通用引物pcr(gp-pcr)、型特異性pcr(ts-pcr)和實時螢光定量pcr(rq-pcr)等方法。

2、pcr產物分析。

包括基因晶元(也稱dna晶元)法、限制性片段長度多型性分析(rflp)、測序法和雜交分析法等。基因晶元法可進行hpv分型及診斷混合感染,且具有通量大、高敏感性和特異性的特點,可用於大範圍篩查,更適於流行病學的調查和疫苗方面的研究。

男性檢測hpv也是有重要意義的,研究顯示有多個性伴侶的男性是高危型和低危型hpv的「運載工具」。男**染高危型hpv主要是亞臨床感染。以往檢測男性hpv感染是通過**灌洗液或**檢測hpv dna,但存在取材的困難、檢測手段的敏感性低、實驗程式複雜,缺乏正常對照等缺點。

目前臨床上對於hpv的檢測還沒有既能分型又能定量,既非常準確又**便宜的方法,為了解決這個問題,一是根據不同的目的進行不同的檢測,一是傾向於聯合應用,例如,液基細胞學檢測(tct)聯合細胞hc2檢測、或者基因晶元進行篩查後,進行hc2半定量檢測等。另外,性伴同時進行檢測,無論對hpv低危型引起的尖銳濕疣,還是hpv高危型引起的宮頸癌等疾病,都有重要意義。

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