編譯整理：強子（二） 細胞學標本的處理
本文提出的假體周圍積液處理方案如圖2。具體建議抽取20-50ml，分為三等份而分別進行細胞病理檢查、流式細胞學免疫分型、分子遺傳學檢測。
圖2.假體周圍積液處理方案。建議抽取20-50ml，分為三等份，每份5-15ml。乙份送細胞病理檢測，做wright-giemsa染色和巴氏染色，同時做細胞塊進行cd30免疫組化；乙份送流式細胞學，做t細胞標記物的免疫分型，包括cd30和trbc1限制性分析；乙份做trg和trb基因分子遺傳學檢測，確定轉殖性。
細胞學標本：塗片及細胞塊
乳腺假體植入後常見積液，且一般是血腫，是和手術操作本身相關、或可能存在感染所致。與此不同，bia-alcl中的積液一般發生於隆乳數年後，即所謂的「遲發」黏液腫；具體是指初次手術後≥1年出現的積液。
積液患者最顯著的特徵是假體和纖維包膜之間的間隙內存在渾濁的液體蓄積。細針抽吸並細胞學評估是bia-alcl患者積液評估中快速、安全且有效的方法。積液可自少量、至500ml以上不等。對積液進行形態學評估，也可在細胞離心濃縮後進行。淋巴細胞分離液（ficoll-hypaque）密度梯度離心法可以去除退變的細胞和碎屑而顯著改善細胞製片的質量。
bia-alcl中的淋巴瘤細胞在細胞學標本中，類似淋巴結或淋巴結外間變性大細胞淋巴瘤的細胞表現。wright-giemsa染色或may-grünwald-giemsa染色製片中，細胞豐富、均質，為無黏附的大細胞構成，細胞核呈不規則分葉狀，有顯著核仁，胞質豐富。瘤細胞一般是成熟小淋巴細胞的4-5倍；胞質透明至淡藍色，一般有散在的小空泡，且可見胞質碎片。少見情況下，胞質內大量空泡且相互融合、因此導致腫瘤細胞呈印戒樣表現。背景為顆粒狀或纖維性，有時伴細胞核破裂形成的碎屑。背景中的炎症細胞數量不一，可從極少至大量，具體為小淋巴細胞、中性粒細胞、組織細胞、嗜酸性粒細胞。巴氏染色中可見細胞核深染、伴分葉狀表現，有顯著核仁。淋巴瘤細胞的胞質呈不透明、嗜鹼性。
圖3.bia-alcl細胞學特徵。本例為離心製片細胞學標本wright-giemsa染色，淋巴瘤細胞大而間變性，細胞核不規則，核仁明顯，胞質豐富，偶見空泡狀胞質。
製備細胞塊對於形態學評估和免疫組化檢測都有極大幫助。免疫組化cd30檢測對於bia-alcl的診斷非常可靠，也是最切實可行的方法，且很多壞死細胞的殘影也會有顯色。因此cd30免疫組化中所見淋巴瘤細胞要比常規he染色切片中所見更多。
圖4.bia-alcl細胞學特徵。本例為積液細胞蠟塊，可見散在的較大淋巴瘤細胞，免疫組化cd30顯示大部分細胞為陽性。
bia-alcl中常表達的其他標記還有cd43（約80%）、cd4（約80%）、tia-1（約70%）、顆粒酶b（約70%）、ema（約60%）、cd3（約33%）、cd8（約10%）。儘管大部分病例都不會表達tcr，但據報道tcr αβ和tcr γδ分別可見見於%的病例。根據本文原作者所述，他們對200多例bia-alcl的經驗表明，所有病例均不表達alk；但也有文獻報道alk1的陽性率約8%。bia-alcl也不表達cd1a、tdt、cyclin d1。eb病毒編碼的小rna原位雜交100%為陰性。重要的是，最近已發現有乳腺假體相關的eb病毒陽性大b細胞淋巴瘤。
如果患者最近（數日至數週內）做了腫瘤積液的引流或抽吸，則bia-alcl的診斷可能難度較大：新出現的積液中腫瘤細胞數量可能較少，而主要是中性粒細胞或組織細胞。此外，還有些患者最近切除了假體而未切除包膜、或做了引流而防止積液；這種情況下、即使加做cd30免疫組化，細胞學標本可能也會得出未見腫瘤細胞的假陰性結果。
流式細胞學免疫表型分析
可疑bia-alcl患者的積液應做流式細胞免疫表型分析，評估t細胞是表達cd30、還是異常免疫表型。目前還可通過流式細胞學評估trbc1的表達來進行轉殖性分析。
pcr基礎上的轉殖性分析
積液標本和固定後石蠟包埋細胞塊標本都可以進行pcr相關檢測來評估t細胞受體基因重排。bia-alcl具有trg或trb的單轉殖性重排。文獻中資料表明，41.7%的病例（5/12）具有trb的單轉殖性重排，76.5%的病例（26/34）具有trg的單轉殖性重排。本文原作者提出，bia-alcl病例中的單轉殖比例可能更高一些。單轉殖檢測的成功率可能受限於腫瘤細胞少、或受限於常伴大量壞死。
未完待續——
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